1、首先进入荧光寿命的主页，并点击设置按钮。其次在弹出的设置界面中找到导出按钮。最后点击导出按钮进行导出数据即可。
2、原因是为了方便数据处理和分析。荧光寿命是以指数形式衰减的，而取对数可以将指数形式的数据转化为线性形式，使得数据更易于处理和拟合。通过取对数，可以将荧光寿命的衰减曲线转化为直线形式，从而可以使用线性回归等方法进行拟合。
3、要已知一组t、N的数据（10个以上）利用plot（）绘出其散点图，确定荧光寿命函数模型 利用nlinfit或lsqcurvefit等拟合函数，拟合出其系数 根据t的取值范围，用荧光寿命函数，求出相应的N值。
4、荧光寿命ORIGIN绘图时，残差权重可以看看数据里面自动生成。荧光寿命是指，当某种物质被一束激光激发后，该物质的分子吸收能量后从基态跃迁到某一激发态上，再以辐射跃迁的形式发出荧光回到基态。当去掉激发光后，分子的荧光强度降到激发时的荧光最大强度I0的1/e所需要的时间，常用τ表示。
5、挑选出适宜的测量参数和条件。 接着，将待测样品精准地放置在测量仪器中央的测量池内，确保样品充分接触到激发光源。 然后，通过记录得到的荧光强度随时间变化的曲线，可以分析并计算出荧光寿命的长短。 最后，依据所获得的荧光寿命数据，对样品的荧光特性进行评估，判断其寿命是长还是短。
6、在荧光寿命测量中，stoprate不能超过106的原因与荧光寿命测量的原理和数据采集方式密切。荧光寿命是荧光分子在激发态停留的时间。当荧光分子被激发后，会发出荧光并返回到基态。荧光寿命的测量通过记录荧光分子发出的荧光强度随时的变化来完成。
1、平均荧光强度的计算基于单通道荧光图片，其定义为特定区域内的荧光强度总和除以该区域面积。首先，打开图像并分离单通道，对于RGB格式，可能需要先进行通道分割。选择合适的阈值以区分信号和背景，推荐使用默认阈值以减少误差。尝试不同的阈值算法，如Auto Threshold，选择最符合要求的。
2、定义篇 一张单通道的荧光图像，每个像素的灰度值正是其荧光强度的体现。计算特定区域的平均荧光强度，公式如下：Mean （平均荧光强度） = Integrated Density （荧光强度总和） / Area （区域面积）理解了这个基本概念后，ImageJ为我们提供了精细的操作步骤来实现这一过程。
3、步骤1：细胞分割与ROI Manager应用 从上篇教程中，学习细胞计数的方法，分割出细胞核并使用ROI Manager管理选区。 将每个细胞的轮廓添加到ROI Manager，便于后续测量。
首先进入荧光寿命的主页，并点击设置按钮。其次在弹出的设置界面中找到导出按钮。最后点击导出按钮进行导出数据即可。
原因是为了方便数据处理和分析。荧光寿命是以指数形式衰减的，而取对数可以将指数形式的数据转化为线性形式，使得数据更易于处理和拟合。通过取对数，可以将荧光寿命的衰减曲线转化为直线形式，从而可以使用线性回归等方法进行拟合。
挑选出适宜的测量参数和条件。 接着，将待测样品精准地放置在测量仪器中央的测量池内，确保样品充分接触到激发光源。 然后，通过记录得到的荧光强度随时间变化的曲线，可以分析并计算出荧光寿命的长短。 最后，依据所获得的荧光寿命数据，对样品的荧光特性进行评估，判断其寿命是长还是短。
而且用同一种仪器在不同空间和时间下测量的数据误差也能达到1%。但是测量后经过各自的空白校正，相信误差不会超过1%，所以用不同的仪器测的数据整理后是可以通用的，但是没有经过空白校正的数据不能互相代替。 PS：用紫外分光时一定要用石英比色皿，不能用玻璃比色皿，因为紫外线很难透过玻璃的。
首先，打开FlowJo，进入工作台，你需要找到你的原始数据，通常以fcs格式存储。点击Ctrl+A全选所有文件，然后直接拖拽到All Samples区域，如图像所示。在数据预处理阶段： 创建散点图 - 点击fcs文件，你会看到默认的SSC（侧向散射）在X轴，FSC（前向散射）在Y轴。这两个参数揭示了细胞的大小和复杂度。
打开flowjo软件，导入原始数据并且进行初步的门分析。将分析的框架批量覆盖所有样本，批量圈门。打开Tableeditor（数据统计）模块，将任意样本的门逻辑拖入Tableeditor框架中。在通道中标注一下圈门的命名。有需要可添加heatmap效果（该效果仅体现在html中，excel无法导出此热图效果）。
第一先打开FlowJo10，鼠标直接拖动数据所在文件夹到软件中导入数据，对数据进行处理：双击fcs格式数据出现流式散点图（建议首先对空白组细胞先处理），圈门（根据实验目的选择合适的圈门工具）并点击ok确定。第二双击圈门部位，根据实验目的以及染料的荧光激发，选择流式图合适的横坐标和纵坐标。
1、如果是做的相对定量，用CTmean的结果就可以了，计算方法就是R＝2-ΔΔCt，现在很多仪器你只要设置的时候明确标出内参基因和目的基因，这个结果也是会有自带软件给计算出来的。
2、看CT值是分析荧光定量PCR最直观的一个数据，CT值一般在35左右就失去参考价值了，平时我们实验室用BIODAI-PCR荧光定量法测得的扩增曲线的起跳值基本在30左右。
3、实时荧光定量PCR实验数据分析详解实时荧光定量PCR（qPCR）是一种通过监测荧光信号实时评估DNA扩增过程的技术。它通过荧光基团在PCR循环中积累，确定样品中目的基因的含量。其基本原理涉及Ct值的计算，它是PCR信号达到阈值时所需的循环数。
